Solution CDMO de Vecteurs Lentiviraux

Contexte
Une spin-off de recherche avait besoin d'une production à grande échelle de vecteurs lentiviraux à l'échelle de 20 L pour une thérapie CAR-NK prête à l'emploi. Les exigences comprenaient un titre >1E7 TU/mL, un taux de positivité >40 % et un VCN <5 copies/cellule pour supporter 10 lots de production cellulaire.

Défi principal
La faible efficacité de transduction des cellules NK nécessitait un titre viral exceptionnellement élevé. La montée à l'échelle de 20 L tout en maintenant la cohérence et en respectant le délai de 5 mois pour la phase d'ingénierie était cruciale.

Optimisation

• Optimisation des conditions de culture en suspension sans sérum

• Développement d'activateurs de transduction spécialisés pour les cellules NK

• Mise en œuvre de systèmes automatisés de surveillance et de contrôle

• Établissement de protocoles rapides de libération de la qualité

Résultat

• Titre atteint : 3,8E7 TU/mL avec un taux de positivité de 43,6 %

• VCN maintenu en dessous de 5 copies/cellule

• Phase d'ingénierie terminée en 5 mois

• Un seul lot a permis de réaliser 15 lots de production cellulaire

  
  

Contexte
Une société en phase clinique avait besoin d'une production de vecteurs lentiviraux de qualité GMP pour une thérapie TCR-T à l'échelle de 10 L. Les spécifications comprenaient un titre >5E8 TU/mL, un taux de positivité >30 % pour un insert de 1950 pb et un VCN <5 copies/cellule pour traiter 80 patients.

Défi principal
L'exigence d'un titre ultra-élevé combinée au besoin d'une expression précise du TCR. Le délai serré de 7 mois pour la production GMP et les exigences réglementaires strictes ont accru la complexité.

Optimisation

• Développement d'une lignée cellulaire d'encapsidation à haut titre

• Mise en œuvre d'une technologie de concentration par ultra-filtration

• Établissement d'un système complet de contrôle de la qualité

• Optimisation du constructeur vectoriel pour une expression précise du TCR

Résultat

• Titre atteint : 6,8E8 TU/mL avec un taux de positivité de 36,4 %

• VCN maintenu à 4,5 copies/cellule

• Production GMP terminée en 7 mois

• Un seul lot a produit 9,8E10 TU, suffisant pour 98 patients

Contexte
Un partenariat université-hôpital avait besoin d'une production à grande échelle de vecteurs lentiviraux à l'échelle de 100 L pour une thérapie génique des HSC. L'insert de 4433 pb nécessitait un titre >2E8 TU/mL et un VCN >3 copies/cellule pour traiter 250 patients.

Défi principal
La taille extrêmement grande de l'insert, proche de la limite d'encapsidation. La production à l'échelle massive de 100 L tout en maintenant la qualité. L'exigence d'un VCN élevé dans les HSC a ajouté une complexité supplémentaire.

Optimisation

• Développement de nouvelles protéines de capside pour améliorer l'encapsidation

• Mise en œuvre d'une stratégie de fonctionnement de bioréacteurs en parallèle

• Optimisation du protocole de transduction pour les HSC

• Établissement d'un régime complet de tests de sécurité

Résultat

• Titre atteint : 3,2E8 TU/mL malgré la grande taille de l'insert

• VCN maintenu à 3,6 copies/cellule dans les HSC

• Production cGMP de 100 L terminée en 8 mois

• Un seul lot a produit 2,8E11 TU, suffisant pour 300 patients